ICS 65.020.30 B 44 GB 中华人民共和国国家标准 GB/T14926.26—2001 代替GB/T14926.26—1994 实验动物 小鼠脑脊髓炎病毒检测方法 Laboratory animalMethod for examination of Theiler's mouse encephalomyelitis virus (TEMV) 2002-05-01实施 2001-08-29发布 中华人民共和国 发布 国家质量监督检验检疫总局 GB/T 14926.26—2001 前言 本标准是对GB/T14926.26—1991《实验动物小鼠脑脊髓炎病毒检验方法》的修订。对检测方法 未作改动，仪对原标准的个别文字作了修改。 本标准由中华人民共和国科学技术部提出并归口。 本标准起草单位：中国实验动物学会 本标准主要起节人：州霞琴。 本标准丁1994年1月首次发布。 I 中华人民共和国国家标准 实验动物 GB/T 14926.26—2001 小鼠脑脊髓炎病毒检测方法 代替 CB/T [1926.28—199-1 Laboratory animal-Method for cxamination of Theilcr's mouse cncephalnmyclitis virus (TMEV) 1范围 木标规定了小鼠脑脊髓炎病毒(TMEV)的检测方法,试剂等。 本标准适用]小鼠TMEV的检测。 2引用标准 下列标准所包含的条义·通过在不标准引用而构成为不标准的条文，不标准出版时，所示版不均 为有效。所有标准都会被修订，使用不标准的各方应探讨使用下列标准最新版的可能性。 GB/T14926.50—2001实验动物酶联免疫啵附试验 GB/T14926.51—2001实验动物免疫酶试验 GB/T141926.52—2001实验动物免疫荧光试验 GB/T11926.51—2001实验动物血凝抑制试验 3原理 根据免疫学原理，深用TMEV抗原检测小鼠血清中TMEV抗体：或根据TMEV在一定的条竹 下，能凝集人“(门”型红细脑·这种凝集红细胞的能力可被特异性抗体所抑制的原理，检测小鼠血清中 TMEV 抗体, 4主要试剂和器材 4.1 试剂 4. 1. 1 FLISA 抗原 4.1.1.1特另性抗原 TMEV(GD训株）感染小鼠，待发病后取脑.研磨，制成10%悬液，3000r/min离心10min后取上 清液接种 BHK21细胞,吸附1.5～2 h,加维持液培养1～5l 左右，当纠胞病变达|「～「「1吋收获 冻融三次或超声波处理后，低速离心去除细胞碎片，上清液再经超速离心浓缩后制成EI.ISA抗原， 4. 1.1.2正常抗原 BHK21 细胞冻融破碎后,经低速离心去除细胞碎片而获得的上清液。 4.1.2抗原片 TMEV(GD株)感染BHK21细胞.培养4～5 d.病变达I|～「「时,将细胞用映酶分散,用 PBS 洗涤.滴片，温十燥后，冷内酮固定10 min，一2CC.保存。 中华人民共和国国家质量监督检验检疫总局2001-08-29批准 2002-05-01实施 1