ICS 65.150 B 50 SC 中华人民共和国水产行业标准 SC/T 7217—2014 激隐核虫病诊断规程 Protocol of diagnosis for cryptocaryoniasis 行业标准信息服务平台 2014-03-24发布 2014-06-01实施 中华人民共和国农业部 发布 SC/T 72172014 前言 本标准按照GB/T1.1一2009给出的规则起草。 请注意本文件的某些内容可能涉及专利。本文件的发布机构不承担识别这些专利的责任。 本标准由农业部渔业局提出。 本标准由全国水产标准化技术委员会（SAC/TC156）归口。 本标准起草单位：中山大学、中华人民共和国广州出入境检验检疫局。 本标准主要起草人：李安兴、柏建山、李言伟。 行业标准信息服务平台 SC/T 7217—2014 刺激隐核虫病诊断规程 1 范围 本标准规定了刺激隐核虫病临床症状检查、刺激隐核虫（Cryptocaryonirritans）形态学鉴定和聚合 酶链式反应(PCR)检测的方法。 本标准适用于刺激隐核虫病的流行病学调查、诊断、检疫和监测。 2规范性引用文件 下列文件对于本文件的应用是必不可少的。凡是注日期的引用文件，仅注日期的版本适用于本文 件。凡是不注日期的引用文件，其最新版本（包括所有的修改单）适用于本文件。 GB/T6682分析实验室用水规格和试验方法 SC/T7103水生动物产地检疫采样技术规范 3术语和定义 下列术语和定义适用于本文件。 3. 1 刺激隐核虫病 cryptocaryoniasis 由刺激隐核虫感染海水硬骨鱼类体表和鳃，并引起鱼类发病或死亡的一种疾病 4试剂和材料 4.1水：符合GB/T6682中一级水的规格。 4.2蛋白酶K(20mg/mL)。 4.3引物：浓度为10umol/L。 引物1:5'-GTTCCCCTTGAACGAGGAATTC-3 引物 2:5'-TTAGTTTCTTTTCCTCCGCT-3' 引物3:5'-TGAGAGAATTAATCATAATTTATA-3 4. 4 DNA marker(DL2000 marker)。 4.5PCR试剂：TagDNA聚合酶、10XPCRbuffer、MgCl2、dNTPs、灭菌双蒸水。 服务平台 4.6微量样品基因组DNA抽提试剂盒（可使用其他同等效果的试剂盒）。 4.7PCR产物回收试剂盒。 4.8琼脂糖(分析纯)。 4.9TE缓冲液，见附录A。 4.105XTBE贮存液，见附录A。 4.11EB溶液，见附录A。 4. 12 210×加样缓冲液。 4.13其他化学试剂（HCI、H.BO等）：分析纯级产品。 5仪器设备 5 5.1解剖盘、剪刀、镊子。