ICS11.220 CCSB41 中华人民共和国国家标准 GB/T45106—2024 动物钩端螺旋体病诊断技术 Diagnostictechniqueofleptospirosisinanimals 2024-12-31发布 2025-07-01实施 国家市场监督管理总局 国家标准化管理委员会发布 目 次 前言 Ⅲ ………………………………………………………………………………………………………… 引言 Ⅳ ………………………………………………………………………………………………………… 1 范围 1 ……………………………………………………………………………………………………… 2 规范性引用文件 1 ………………………………………………………………………………………… 3 术语和定义 1 ……………………………………………………………………………………………… 4 缩略语 1 …………………………………………………………………………………………………… 5 临床诊断 1 ………………………………………………………………………………………………… 5.1 流行病学 1 …………………………………………………………………………………………… 5.2 临床症状 2 …………………………………………………………………………………………… 5.3 实验室常规检查 2 …………………………………………………………………………………… 5.4 剖检变化 2 …………………………………………………………………………………………… 5.5 结果判定 2 …………………………………………………………………………………………… 6 生物安全要求 2 …………………………………………………………………………………………… 7 样品采集与保存 3 ………………………………………………………………………………………… 7.1 样品采集 3 …………………………………………………………………………………………… 7.2 样品保存 3 …………………………………………………………………………………………… 8 分离培养鉴定 3 …………………………………………………………………………………………… 8.1 器材 3 ………………………………………………………………………………………………… 8.2 试剂 3 ………………………………………………………………………………………………… 8.3 样品处理与培养 3 …………………………………………………………………………………… 8.4 结果判定 3 …………………………………………………………………………………………… 9 PCR 4 ……………………………………………………………………………………………………… 9.1 器材 4 ………………………………………………………………………………………………… 9.2 试剂 4 ………………………………………………………………………………………………… 9.3 提取DNA 4 ………………………………………………………………………………………… 9.4 引物 4 ………………………………………………………………………………………………… 9.5 扩增体系 4 …………………………………………………………………………………………… 9.6 扩增程序 4 …………………………………………………………………………………………… 9.7 扩增产物电泳检测 5 ………………………………………………………………………………… 9.8 实验成立条件 5 ……………………………………………………………………………………… 9.9 结果判定 5 …………………………………………………………………………………………… 10 MAT 5 …………………………………………………………………………………………………… 10.1 器材 5 ………………………………………………………………………………………………… ⅠGB/T45106—2024 10.2 试剂 5 ………………………………………………………………………………………………… 10.3 定性试验 5 …………………………………………………………………………………………… 10.4 定量试验 6 …………………………………………………………………………………………… 10.5 MAT结果判定 7 …………………………………………………………………………………… 11 综合判定 7 ………………………………………………………………………………………………… 12 鉴别诊断 7 ………………………………………………………………………………………………… 附录A(规范性) 试剂溶液的配制方法 8 ………………………………………………………………… A.1 EMJH培养基 8 ……………………………………………………………………………………… A.2 50×TAE贮存液 8 …………………………………………………………………………………… A.3 1%琼脂糖凝胶 9 …………………………………………………………………………………… A.4 PBS缓冲液 9 ………………………………………………………………………………………… 附录B(资料性) 引物使用说明 10 ………………………………………………………………………… 附录C(资料性) 各血清群标准抗原及阳性血清的制备 11 ……………………………………………… C.1 各血清群标准抗原的制备 11 ………………………………………………………………………… C.2 各血清群标准阳性血清的制备 11 …………………………………………………………………… 附录D(资料性) MAT结果判定示意图 13 ……………………………………………………………… 附录E(资料性) 钩体病的鉴别诊断 16 …………………………………………………………………… E.1 犬细小病毒病 16 ……………………………………………………………………………………… E.2 犬瘟热 16 ……………………………………………………………………………………………… E.3 牛羊猪布鲁氏杆菌病 16 ……………………………………………………………………………… 参考文献 17 …………………………………………………………………………………………………… ⅡGB/T45106—2024