书 书 书犐犆犛 ６５ ． １５０ 犅 ５１ 中华人民共和国国家标准 犌犅 ／ 犜 １５１０１ ． ２ — ２００８ 代替 ＧＢ ／ Ｔ１５１０１．２ — １９９４ 中国对虾 　 苗种 犆犺犻狀犲狊犲狊犺狉犻犿狆 — 犛犲犲犱犻狀犵狊 ２００８  ０４  ０９ 发布 ２００８  ０６  ０１ 实施 中华人民共和国国家质量监督检验检疫总局 中国国家标准化管理委员会 发布书 书 书前 　　 言 　　 ＧＢ ／ Ｔ１５１０１ 《 中国对虾 》 分为两个部分 ： ——— ＧＢ ／ Ｔ１５１０１．１ — ２００８ 　 中国对虾 　 亲虾 ； ——— ＧＢ ／ Ｔ１５１０１．２ — ２００８ 　 中国对虾 　 苗种 。 本部分为 ＧＢ ／ Ｔ１５１０１ 的第 ２ 部分 。 本部分代替 ＧＢ ／ Ｔ１５１０１．２ — １９９４ 《 中国对虾养殖 　 苗种 》， 主要变化如下 ： ——— 原标准名称 《 中国对虾养殖 　 苗种 》 改为 《 中国对虾 　 苗种 》； ——— 增加了术语对应的英文 ； ——— 删除了弱苗率的定义和要求 ； ——— 苗种规格的最低限由 ０．７ｃｍ 修改为 ０．８ｃｍ ； ——— 增加了对苗种来源的要求 ； ——— 增加了虾苗计数方法的内容 ； ——— 增加了对主要病毒性疾病的检疫要求 ； ——— 增加了苗种运输的内容 ； ——— 增加了规范性附录 “ 涛拉综合症的检疫 ”（ 见附录 Ａ ）； ——— 增加了资料性附录 “ ＲＮＡ 的实验室操作要求 ”（ 见附录 Ｂ ）。 本部分的附录 Ａ 为规范性附录 ， 附录 Ｂ 为资料性附录 。 本部分由中华人民共和国农业部提出 。 本部分由全国水产标准化技术委员会海水养殖分技术委员会归口 。 本部分起草单位 ： 中国水产科学研究院黄海水产研究所 。 本部分主要起草人 ： 张岩 、 陈四清 、 于东祥 、 李鲁晶 。 本部分所代替标准的历次版本发布情况为 ： ——— ＧＢ ／ Ｔ１５１０１．２ — １９９４ 。 Ⅰ 犌犅 ／ 犜 １５１０１ ． ２ — ２００８ 中国对虾 　 苗种 １ 　 范围 ＧＢ ／ Ｔ１５１０１ 的本部分规定了中国对虾 （ 犉犲狀狀犲狉狅狆犲狀犪犲狌狊犮犺犻狀犲狀狊犻狊 ） 苗种的规格 、 质量要求 、 检验方 法 、 检验规则和运输方法 。 本部分适用于中国对虾苗种的生产 、 销售和使用 。 ２ 　 规范性引用文件 下列文件中的条款通过 ＧＢ ／ Ｔ１５１０１ 的本部分的引用而成为本部分的条款 。 凡是注日期的引用文 件 ， 其随后所有的修改单 （ 不包括勘误的内容 ） 或修订版均不适用于本部分 ， 然而 ， 鼓励根据本部分达成 协议的各方研究是否可使用这些文件的最新版本 。 凡是不注日期的引用文件 ， 其最新版本适用于本 部分 。 ＧＢ ／ Ｔ１５１０１．１ — ２００８ 　 中国对虾 　 亲虾 ＮＹ５０５２ 　 无公害食品 　 海水养殖用水水质 ３ 　 术语和定义 下列术语和定义适用于 ＧＢ ／ Ｔ１５１０１ 的本部分 。 ３ ． １ 规格合格率 　 狊犻狕犲狇狌犪犾犻犳犻犲犱狉犪狋犲 符合规格要求的苗种数占苗种总数的百分比 。 ３ ． ２ 体色异常率 　 犪犫狀狅狉犿犪犾犫狅犱狔犮狅犾狅狌狉狉犪狋犲 体色异常 （ 如发白 、 发红 、 腹部色素细胞异常扩张等 ） 苗种数占苗种总数的百分比 。 ３ ． ３ 伤残率 　 狑狅狌狀犱犪狀犱犱犲犳狅狉犿犻狋狔狉犪狋犲 发育畸形或附肢和额角损伤的苗种数占苗种总数的百分比 。 ３ ． ４ 带病率 　 犻犾犾狀犲狊狊狊犲犲犱犻狀犵狉犪狋犲 患有能现场判别病症或附着有其他附着物的苗种数占苗种总数的百分比 。 ３ ． ５ 死亡率 　 犱犲犪狋犺狉犪狋犲 死亡的个体数占苗种总数的百分比 。 ４ 　 苗种质量要求 ４ ． １ 　 苗种来源 由符合 ＧＢ ／ Ｔ１５１０１．１ — ２００８ 规定的中国对虾亲虾繁殖培育的苗种 ， 苗种体长不小于 ０．８ｃｍ 。 ４ ． ２ 　 各项指标要求 ４ ． ２ ． １ 　 外观 虾苗应规格整齐 ， 体色正常 ， 体表光滑 ， 健壮 、 活力强 ， 舀起后迅速伏底 ， 搅动后有明显的顶流现象 。 ４ ． ２ ． ２ 　 质量要求 苗种质量应符合表 １ 各项指标的要求 。 １ 犌犅 ／ 犜 １５１０１ ． ２ — ２００８ 表 １ 　 中国对虾苗种质量要求 序 　 号 项 　 目 指 　 标 １ 规格合格率 ／ ％ ≥ ９５ ２ 体色异常率 ／ ％ ≤ １ ３ 伤残率 ／ ％ ≤ １ ４ 带病率 ／ ％ ≤ １ ５ 死亡率 ／ ％ ≤ ０．０３ ６ 对虾白斑病毒 （ ＷＳＳＶ ） 不得检出 ７ 涛拉综合症病毒 （ ＴＳＶ ） 不得检出 ４ ． ３ 　 苗种的检疫 应对苗种进行对虾白斑病 （ ＷＳＳＶ ）、 涛拉综合症 （ ＴＳＶ ） 检疫 。 ５ 　 虾苗计数方法 ５ ． １ 　 带水容量法 将虾苗盛于已知容量的容器内 ， 充分搅拌使虾苗分布均匀 ， 用 １００ｍＬ ～ ２００ｍＬ 的容器量取虾苗 ， 逐尾进行计数 ， 重复 ２ 次 ， 计算 ３ 次的算术平均值 ， 根据水体之比 ， 算出整个容器中虾苗总数 。 ５ ． ２ 　 无水容量法 又称干量法 ， 用塑料纱网或尼龙筛绢制成杯状漏斗容器 ， 或用不锈钢薄板制成半圆形杯状漏斗瓢 ， 用此杯捞取集苗箱内的虾苗 ， 逐尾进行计数 ， 重复 ２ 次 ， 计算每杯的算术平均值 ， 按杯数计算出虾苗 总数 。 ５ ． ３ 　 重量计数法 用尼龙筛绢网袋捞取集苗箱内的虾苗 ， 滴水 ０．５ｍｉｎ 称其重量 ， 重复 ３ 次 ， 计算出每千克或每克虾 苗的尾数 。 ６ 　 检验方法 ６ ． １ 　 规格合格率测定 直接用直尺 （ 精度 １ｍｍ ） 测量虾苗从眼柄基部至尾节末端的长度 ， 每次取样数不得低于 ３０ 尾 。 ６ ． ２ 　 体色异常率 、 死亡率 、 伤残率 、 带病率 活体直接观察 ， 测死亡率每次取样数不得低于 １００００ 尾 ， 测体色异常率 、 伤残率 、 带病率每次取样 数不得低于 １０００ 尾 。 ６ ． ３ 　 对虾白斑病的检疫 对虾白斑病病毒的检疫见 ＧＢ ／ Ｔ１５１０１．１ — ２００８ 附录 Ｂ 的规定 。 ６ ． ４ 　 涛拉综合症的检疫 涛拉综合症的检疫见附录 Ａ 。 ７ 　 检验规则 ７ ． １ 　 组批 以一个育苗池为一个检验批 ， 销售前按批检验 。 ７ ． ２ 　 取样方法 每个检验项目随机取样 ３ 次 ， 取 ３ 次结果的算术平均值 。 ７ ． ３ 　 判定规则 按第 ４ 章规定的各项指标判定苗种是否合格 ， 有一项不达标即判定为批不合格 。 ２ 犌犅 ／ 犜 １５１０１ ． ２ — ２００８ ８ 　 苗种的运输 ８ ． １ 　 苗种运输可采取帆布桶充气运输 、 塑料袋充氧运输 。 ８ ． ２ 　 气温 ２０℃ 左右 ， 用帆布桶运输体长 １．０ｃｍ ～ １．５ｃｍ 的虾苗 ， 运输密度可在 １５ 万尾 ／ ｍ ３ ～ ２５ 万尾 ／ ｍ ３ ； 规格 ３０ｃｍ×３０ｃｍ×７５ｃｍ 的塑料袋充氧运输 ， 在水温 ２０℃ ～ ２４℃ 时 ， 每袋装水四分之 一 ， 可运输 ０．８ｃｍ ～ １．０ｃｍ 的虾苗 ２．５ 万尾 ～ ３ 万尾 ， 运输时间 ２０ｈ 以内 ， 成活率在 ９０％ 以上 。 ８ ． ３ 　 运输用水与苗种培育用水的温差应小于 ３℃ ， 盐度差小于 ３ 。 ８ ． ４ 　 运输应尽量在早晚进行 ， 避免阳光曝晒和雨淋 。 ８ ． ５ 　 运输用水应符合 ＮＹ５０５２ 的要求 。 ３ 犌犅 ／ 犜 １５１０１ ． ２ — ２００８ 附 　 录 　 犃 （ 规范性附录 ） 涛拉综合症的检疫 犃 ． １ 　 实验室操作要求 进行涛拉综合症检疫的实验室操作应满足附录 Ｂ 的要求 。 犃 ． ２ 　 犚犖犃 模板的提取 ａ ） 　 按不同大小的虾苗或感染期取不同组织样品 ０．１ｇ 左右 ， 其中 ， 对虾幼体 、 仔虾取完整个体 ， ３ｃｍ 以下的幼虾取摘除虾眼的头胸部 ， 较大的幼虾可取鳃区或数根鳃丝 ， 怀疑为慢性期感染 的较大幼虾或成虾取对虾的淋巴器官 。 样品可暂时保存于 －２０℃ 。 ｂ ） 　 所取样品在 ０℃ 以下研磨混合均匀 ， 取 ０．１ｇ ～ ０．５ｇ 置于 １．５ｍＬ 无菌微量离心管中 ， 加入 ０．５ｍＬ ～ １ｍＬＴｒｉｚｏｌ ＴＭ 试剂 ， 用研磨棒研磨 ， 然后置室温 ５ｍｉｎ 。 ｃ ） 　 加入 ０．２ｍＬ 三氯甲烷 ， 振摇混合 １５ｓ ， 室温放置 ３ｍｉｎ 。 ｄ ） 　 于 １００００ｒ ／ ｍｉｎ 离心 ５ｍｉｎ 。 ｅ ） 　 仔细吸取上层水相 ， 移至一支无 ＲＮＡ 酶的微量离心管中 。 ｆ ） 　 加 ０．５ｍＬ 异丙醇 ， 混匀 ， 置室温 １０ｍｉｎ 。 ｇ ） 　 １００００ｒ ／ ｍｉｎ 离心 １０ｍｉｎ ， 倒去上清液 。 ｈ ） 　 加入 １ｍＬ 无 ＲＮＡ 酶的 ７０％ 乙醇 ， 振摇 １ｍｉｎ ， 再于 １００００ｒ ／ ｍｉｎ 离心 ３ｍｉｎ ， 小心倒去上 清液 。 ｉ ） 　 敞口颠倒离心管 ， 于室温晾干沉淀 ， 加入 ２０ μ Ｌ ～ １００ μ Ｌ 无 ＲＮＡ 酶的水溶解 ＲＮＡ 沉淀 ， 立即 用于 ＲＴＰＣＲ 或保存于 －７０℃ 待用 。 犃 ． ３ 　 犚犜犘犆犚 扩增 Ｆ１ 引物序列如下 ： ５ ’ ＴＣＡＡＴＧＡＧＡＧＣＴＴＧＧＴＣＣ３ ’。 反应体系按照表 Ａ．１ 的规定 ， 扩增程序如下 ： ６