书 书 书犐犆犛 １３ ． ３００ 犆犆犛犃 ８０ 中华人民共和国国家标准 犌犅 ／ 犜 ４１６２３ — ２０２２ 化学品 　 鸟类急性经口毒性试验 犆犺犲犿犻犮犪犾狊 — 犃狏犻犪狀犪犮狌狋犲狅狉犪犾狋狅狓犻犮犻狋狔狋犲狊狋 ２０２２  ０７  １１ 发布 ２０２３  ０２  ０１ 实施 国家市场监督管理总局 国家标准化管理委员会 发布书 书 书前 　　 言 　　 本文件按照 ＧＢ ／ Ｔ１．１ — ２０２０ 《 标准化工作导则 　 第 １ 部分 ： 标准化文件的结构和起草规则 》 的规定起草 。 请注意本文件的某些内容可能涉及专利 。 本文件的发布机构不承担识别专利的责任 。 本文件由全国危险化学品管理标准化技术委员会 （ ＳＡＣ ／ ＴＣ２５１ ） 提出并归口 。 本文件起草单位 ： 生态环境部固体废物与化学品管理技术中心 、 中国检验检疫科学研究院 、 上海市检测中心 、 中国化工经济技术发展中心 、 厦门尹巢科技有限公司 、 国化低碳技术工程中心 、 生态环境部南京环境科学研究所 、 沈阳化工研究院有限公司 、 贵州省分析测试研究院 、 广东全庆检测有限公司 。 本文件主要起草人 ： 刘纯新 、 周丽丽 、 薛宁宁 、 徐淑民 、 窦从从 、 张琨 、 曹梦然 、 赵旭明 、 王蕾 、 赵瑜 、 林绍霞 。 Ⅰ 犌犅 ／ 犜 ４１６２３ — ２０２２ 引 　　 言 　　 本文件主要描述了用于评价化学品对鸟类急性经口毒性的三种试验方法 ： 限度剂量试验 、 ＬＤ ５０  斜率试验 、 ＬＤ ５０  单一试验 。 其中 ＬＤ ５０  斜率试验和 ＬＤ ５０  单一试验是序贯进行的试验 。 根据是否同时需要精准的经口半数致死量 （ ＬＤ ５０ ） 和剂量  反应曲线的斜率数据来选择具体的试验方法 。 序贯试验程序的目的在于剂量的设计 、 试验需求与毒性终点精确度的统一性 。 序贯试验程序能尽量减少受试鸟的数量 。 名为 ＳｅｑｕｅｎｔｉａｌＤｅｓｉｇｎＣａｌｃｕｌａｔｏｒ （ ＳＥＤＥＣ ） 的计算机软件可用于帮助设计剂量并计算 ＬＤ ５０ 、 剂量反应曲线斜率以及置信区间 （ 见 ９．２ ）。 这些方法是由 １９９４ 年在美国佛罗里达彭萨科拉举行的鸟类毒性试验研讨会发起 ， 由 ＳＥＴＡＣ ／ ＯＥＣＤ １ ） 鸟类毒性试验工作组起草 ， 随后通过欧洲和美国的 ＳＥＴＡＣ 公开会议和 ＯＥＣＤ 专家组关门会议讨论后 ， 对序贯试验设计进行修改和完善 。 该序贯试验设计程序已通过广泛的统计验证 。 这三种试验方法的适用条件如下 。 ——— 限度剂量试验 ： 当预测受试物的毒性低 ， 且在限度剂量条件下受试鸟不可能发生死亡时 ， 进行该试验 。 限度剂量与评估目的对应 ， 通常设定为 ２０００ｍｇ ／ ｋｇ 。 除对照组外 ， 限度剂量下用 ５ 只或 １０ 只受试鸟进行试验 （ 见图 １ ）。 ——— ＬＤ ５０  斜率试验 ： 当管理部门或其他要求测剂量  反应曲线斜率 ， 和 ／ 或估计 ＬＤ ５０ 数据及置信区间时 ， 选用此方法 。 除对照组外 ， 阶段 ３ 或阶段 ４ 分别需要 ２４ 只或 ３４ 只受试鸟进行试验 （ 见图 ２ ）。 若计算斜率 ， 可通过经典的剂量  效应试验 （ ＵＳＥＰＡＯＰＰＴＳ８５０．２１００ ） 进行替代计算 。 ——— ＬＤ ５０  单一试验 ： 当只需要经口半数致死量数据 ， 而不需要剂量  反应曲线斜率或 ＬＤ ５０ 置信区间时 ， 可选用此方法 。 可用于估计 ＬＤ ５０ 物种敏感性分布的百分数并为产品标签提供信息 。 该试验包括两个阶段 ， 除了对照组外 ， 用 １４ 只受试鸟来进行试验 （ 见图 ２ ）。 ＬＤ ５０  斜率试验和 ＬＤ ５０  单一试验由多个序贯执行的试验阶段组成 （ 图 ２ ）。 本文件中的 “ 序贯设计和序贯试验 ” 是指 ＬＤ ５０  斜率试验和 ＬＤ ５０  单一试验 。 相关的设计逻辑以及统计原理见附录 Ａ 。 设计 ＬＤ ５０  斜率试验得到的参数可用于计算机模拟试验 ， 达到危害性评估的目的 。 这些参数包括 ＬＤ ５０ 值 、 置信区间和剂量  反应曲线斜率 。 在 ＬＤ ５０  斜率试验或 ＬＤ ５０  单一试验设计的各个阶段中 ， 按照预测的受试物剂量 ， 对 １ 只或多只受试鸟一次性经口染毒 ， 剂量单位为 “ ｍｇ ／ ｋｇ ”。 这些剂量可用于估算 ＬＤ ５０ 。 染毒后观察期 １４ｄ ， 但主要依据染毒后三天受试鸟死亡率及毒性症状来选择试验剂量 ， 若出现受试鸟死亡或症状恢复较快 ， 可缩短该期限 ； 若受试鸟死亡较慢 ， 延长该期限 。 序贯试验 （ ＬＤ ５０  斜率试验或 ＬＤ ５０  单一试验 ） 最初可用从失败的限度剂量试验 （ 出现一只或多只受试鸟死亡 ） 或其他方式获取的信息开始 。 对于预测可能具有高毒性的受试物 ， 试验可从阶段 １ 开始 ， 每组 ４ 只受试鸟 ， 分别按不同剂量染毒 。 选择的剂量宜涵盖估计的 ＬＤ ５０ 区间范围 （ 例如以啮齿类动物或其他鸟种的 ＬＤ ５０ 数据为依据 ）。 根据阶段 １ 的结果估算 ＬＤ ５０ 。 阶段 ２ 使用极大似然估计法 （ ＭＬＥ ） 确定剂量 ， 共 １０ 个剂量 ， 每个剂量 １ 只受试鸟 。 若可从失败的限度剂量试验中估算 ＬＤ ５０ ， 序贯试验也可从阶段 ２ 开始 ， 对于 ＬＤ ５０  斜率试验可连续进行到阶段 ３ ， 也可能到阶段 ４ （ 停止试验的规则见 ７．２．２．３ ～ ７．２．２．６ ）。 １ ） 　 ＳＥＴＡＣ ： 国际环境毒理学与环境化学学会 （ ＳｏｃｉｅｔｙｏｆＥｎｖｉｒｏｎｍｅｎｔａｌＴｏｘｉｃｏｌｏｇｙａｎｄＣｈｅｍｉｓｔｒｙ ） ＯＥＣＤ ： 经济合作与发展组织 （ ＯｒｇａｎｉｚａｔｉｏｎｆｏｒＥｃｏｎｏｍｉｃＣｏｏｐｅｒａｔｉｏｎａｎｄＤｅｖｅｌｏｐｍｅｎｔ ） Ⅱ 犌犅 ／ 犜 ４１６２３ — ２０２２ 化学品 　 鸟类急性经口毒性试验 　　 警示 ——— 使用本文件的人员应有正规实验室工作的实际经验 。 本文件并未指出所有可能的安全问 题 。 使用者有责任采取适当的安全和健康措施 ， 并保证符合国家有关法规规定的条件 。 １ 　 范围 本文件规定了鸟类急性经口毒性试验的受试物信息 、 试验原理 、 试验方法 、 试验程序 、 质量保证与质 量控制 、 数据与报告 。 本文件适用于评价低挥发性 、 具备足够准确度与灵敏度分析方法的化学物质对鸟类的急性经口 毒性 。 本文件不适用于高挥发性的化学物质的急性经口毒性试验 。 ２ 　 规范性引用文件 下列文件中的内容通过文中的规范性引用而构成本文件必不可少的条款 。 其中 ， 注日期的引用文 件 ， 仅该日期对应的版本适用于本文件 ； 不注日期的引用文件 ， 其最新版本 （ 包括所有的修改单 ） 适用于 本文件 。 ＧＢ ／ Ｔ２１８０１ 　 化学品 　 快速生物降解性 　 呼吸计量法试验 ＧＢ ／ Ｔ２１８０２ 　 化学品 　 快速生物降解性 　 改进的 ＭＩＴＩ 试验 （ Ｉ ） ＧＢ ／ Ｔ２１８０３ 　 化学品 　 快速生物降解性 　 ＤＯＣ 消减试验 ＧＢ ／ Ｔ２１８１０ 　 化学品 　 鸟类日粮毒性试验 ＧＢ ／ Ｔ２１８１１ 　 化学品 　 鸟类繁殖试验 ＧＢ ／ Ｔ２１８３１ 　 化学品 　 快速生物降解性 　 密闭瓶法试验 ＧＢ ／ Ｔ２１８４５ 　 化学品 　 水溶解度试验 ＧＢ ／ Ｔ２１８５２ 　 化学品 　 分配系数 （ 正辛醇  水 ） 　 高效液相色谱法试验 ＧＢ ／ Ｔ２１８５３ 　 化学品 　 分配系数 （ 正辛醇  水 ） 　 摇瓶法试验 ＧＢ ／ Ｔ２１８５５ 　 化学品 　 与 ｐＨ 有关的水解作用试验 ＧＢ ／ Ｔ２１８５６ 　 化学品 　 快速生物降解性 　 二氧化碳产生试验 ＧＢ ／ Ｔ２１８５７ 　 化学品 　 快速生物降解性 　 改进的 ＯＥＣＤ 筛选试验 ＧＢ ／ Ｔ２２０５２ 　 用液体蒸气压力计测定液体的蒸气压力 　 温度关系和初始分解温度的方法 ＧＢ ／ Ｔ２２２２８ 　 工业用化学品 　 固体及液体的蒸气压在 １０ －１ Ｐａ 至 １０ ５ Ｐａ 范围内的测定 　 静态法 ＧＢ ／ Ｔ２２２２９ 　 工业用化学品 　 固体及液体的蒸气压在 １０ －３ Ｐａ 至 １Ｐａ 范围内的测定 　 蒸气压平 衡法 ＧＢ ／ Ｔ２７８５０ 　 化学品 　 快速生物降解性 　 通则 ＯＥＣＤ 化学品测试导则 Ｎｏ．１０４ 　 蒸气压 （ ＶａｐｏｕｒＰｒｅｓｓｕｒｅ ） ３ 　 术语和定义 下列术语和定义适用于本文件 。 １ 犌犅 ／ 犜 ４１６２３ — ２０２２ ３ ． １ 急性经口毒性 　 犪犮狌狋犲狅狉犪犾狋狅狓犻犮犻狋狔 一次性经口摄入或在 ２４ｈ 内多次摄入受试物后发生的不良反应 。 ３ ． ２ 剂量 　 犱狅狊犲 摄入受试物的总量 。 注 ： 表示为受试物的质量 （ ｇ 、 ｍｇ ） 或受试物的质量 ／ 单位体重试验动物 （ ｍｇ ／ ｋｇ ， 其中 ｂｗｔ 为试验动物体重 ）。 ３ ． ３ 经口半数致死量 　 犿犲犱犻犪狀犾犲狋犺犪犾狅狉犪犾犱狅狊犲 ＬＤ ５０ 由统计学得出的一次性经口摄入受试物后导致 ５０％ 受试动物死亡的剂量 。 注 ： ＬＤ ５０ 值用摄入受试物的质量 ／ 单位体重试验动物 （ ｍｇ ／ ｋｇ ） 来表示 。 ３ ． ４ 限度剂量 　 犾犻犿犻狋犱狅狊犲 限度试验中