SN 中华人民共和国出入境检验检疫行业标准 SN/T 2522.1—2010 进出口辐照食品检测方法 微生物学筛选法 Detection of irradiated food for import and export- Microbiological screening method 行业标准信息服务平台 2010-03-02发布 2010-09-16实施 中华人民共和国 发布 国家质量监督检验检疫总局 SN/T 2522.1—2010 前 言 本标准的附录A为规范性附录。 本标准由国家认证认可监督管理委员会提出并归口。 本标准起草单位：中华人民共和国宁波出入境检验检疫局。 本标准主要起草人：郭利平、胡群、邹春颖。 本标准系首次发布的出入境检验检疫行业标准 行业标准信息服务平台 I SN/T2522.1—2010 进出口辐照食品检测方法 微生物学筛选法 1范围 本标准规定了进出口食品是否经过辐照处理的微生物学快速筛选方法。 本标准适用于冷冻禽肉、畜肉、水产品等各类生鲜食品是否经过辐照处理的快速筛选。 本标准适用于从上述食品中筛选出可能经过辐照处理的食品，但不排除其他不破坏食品中内毒素 的灭菌方法对该食品进行过处理。 2规范性引用文件 下列文件中的条款通过本标准的引用而成为本标准的条款。凡是注明日期的引用文件，其随后所 究是否可使用这些文件的最新版本。凡是未注明日期的引用文件，其最新版本适用于本标准。 GB/T6682分析实验室用水规格和试验方法 SN/T0330出口食品中微生物学检验通则 3方法提要 内毒素是存在于革兰氏阴性菌细胞外膜上的特有成分，食品经过一定剂量辐照处理后，食品中活的 革兰氏阴性菌基本上会被杀死，但是所残留的内毒素，不会因为辐照处理而消失。因此可以通过对内毒 素的定量测定来估计食品中被杀死和未被杀死的革兰氏阴性菌总数，结合食品中活的革兰氏阴性菌的 培养计数，比较两者差异可以判断该食品是否经过辐照处理。 4术语和定义 下列术语和定义适用于本标准。 4. 1 革兰氏阴性菌 gram negative bacteria,GNB 用革兰氏染色法染色后呈红色或土黄色的细菌，如大肠杆菌、志贺氏菌、沙门氏菌、痫疾杆菌和伤寒 杆菌等。 4. 2 内毒素endotoxin 内毒素又名脂多糖、类脂A、热源，是革兰氏阴性菌的细胞外膜上特有成分，可以迅速地引起鲨血细 胞裂解形成凝固。 4. 3 内毒素检测limulus amoebocyte lysatetest,LAL 内毒素可激活鲨试剂的凝固酶原，使鲨试剂产生凝集反应形成凝胶，利用该现象可以对样品中存在 的内毒素进行检测。 5设备和材料 5.1可调温水浴锅。 SN/T 2522.1—2010 5.2 高压灭菌锅。 5. 3 电热恒温培养箱。 5. 4 高温烘箱。 5.5 涡旋振荡器。 5. 6 电子天平：感量为0.001g。 5.7 均质器：8000r/min~10000r/min。 5.8 灭菌吸管：1mL，具有0.1mL刻度。 5.9 微量移液器：20μL~200μL,100μL~1000μL。 5. 10 次性注射用针筒：100mL。 5.11 试管：18mmX180mm。 5.12 灭菌培养皿：直径90mm。 5.13 酒精灯。 5.14 灭菌剪刀。 5. 15 纯水制备器。 5.16 石蜡封口膜。 5. 17 微量离心管：1.5mL。 5.18 无热源安瓶。 6 培养基与试剂 6.1 实验用水符合GB/T6682二级水规格（电导率≤1.0μus/cm）。 6.2缓冲蛋白陈水（见附录第A.1章）。 6. 3 营养琼脂培养基（见附录第A.2章）。 6. 4 牛奶琼脂培养基（见附录A.3.1)。 6.5 结晶紫溶液（见附录A.3.2）。 6. 6 青霉素溶液（见附录A.3.3）。 6.7 革兰氏阴性菌选择性培养基（见附录A.3.4)。 6.8 注射用无热源生理盐水， 6. 9 去离子水。 6.10 内毒素标准品：50EU/管。 6.11 7样品抽样、贮存和运送 7. 1 抽样数量及抽样方法 按SN/T0330进行。 7.2样品的贮存和运送 不超过30d。 8检验程序 辐照食品微生物学筛选法检验程序见图1。 1） 厦门鲨试剂厂生产的鲨试剂为适合市售产品的实例，给出这一信息是为了方便本标准的使用者，并不表示对该 产品的认可，如果其他产品具有相同的效果，可经实验评估后使用这些等效产品。 2