说明:收录25万 73个行业的国家标准 支持批量下载
文库搜索
切换导航
文件分类
频道
联系我们
问题反馈
文件分类
联系我们
问题反馈
批量下载
ICS 71.040.30 G 66 GB 中华人民共和国国家标准 GB/T 33410—2016 生化试剂中蛋白酶K活性检测方法 Determination of the activity of protease K in biochemical reagents 2016-12-30发布 2017-07-01实施 中华人民共和国国家质量监督检验检疫总局 发布 中国国家标准化管理委员会 GB/T33410—2016 前言 本标准按照GB/T1.1一2009给出的规则起草。 本标准由全国生化检测标准化技术委员会(SAC/TC387)提出并归口。 本标准起草单位:深圳市计量质量检测研究院、中国测试技术研究院、中国标准化研究院 本标准主要起草人:林霖、周李华、赖心田、兰全学、马爱进、陈国培、李浙、潘兰芳、杨国武 GB/T33410—2016 生化试剂中蛋白酶K活性检测方法 1范围 本标准规定了生化试剂中蛋白酶K活性检测方法。 本标准适用于分子生物学实验中使用的蛋白酶K活性的测定。 规范性引用文件 下列文件对于本文件的应用是必不可少的。凡是注日期的引用文件,仅注日期的版本适用于本文 件。凡是不注日期的引用文件,其最新版本(包括所有的修改单)适用于本文件。 GB/T6682分析实验室用水规格和试验方法 3术语和定义 下列术语和定义适用于本文件。 3.1 蛋白酶K活性单位 proteaseKactivityunit 在55℃,pH8.0时,1min内水解酪蛋白产生1μgL-酪氨酸为一个酶活性单位。 注:活性单位为U/mg、U/g或U/mL。 4原理 蛋白酶K是一种切割活性较广的丝氨酸蛋白酶,可催化含有较多的丝氨酸位点的α-酪蛋白水解。 本方法中采用α-酪蛋白为反应底物,经蛋白酶K催化水解为L-酪氨酸,在275nm处测定吸光度值。再 通过测量各个浓度的L-酪氨酸标准溶液在275nm处的吸光度值,并构建标准曲线得出线性回归方程, 以外标法定量。计算蛋白酶K的酶活性。 5仪器设备及器具 5 5.1 恒温水浴锅:控温精度王0.2℃。 5.2pH计:精确至0.01pH。 5.3# 紫外-可见分光光度计:吸光度值精确至0.001。 5.41cm石英比色皿l。 5电子天平:感量0.0001g。 5.5 6试剂 除非另有规定,本方法所用试剂均为分析纯,水为GB/T6882规定的三级水。 1 GB/T33410—2016 6.10.01mol/LTris·HCI缓冲液(pH8.0) 称取12.11gTrisbase(三甲基氨甲烷盐酸盐)加人适量去离子水使其溶解,定容到100mL,得 1mol/LTris·HCl缓冲液,用浓盐酸调至pH8.0;再取1mL1mol/LTris·HCI缓冲液加去离子水 定容至100mL,即得0.0l mol/LTris·HCl缓冲液。 6.20.4mol/L三氯乙酸溶液 称取三氯乙酸65.40g,用去离子水溶解并定容至1000mL。 6.3HCI溶液 量取8.33mL浓盐酸加人到50mL去离子水中,定容至100mL,得1mol/LHCl 量取10.00mL1mol/LHCl加去离子水定容至100mL,得0.1mol/LHCl。 6.40.5mol/LNaOH溶液 称取2gNaOH,溶解于50mL去离子水中,定容至100mL。 6.510g/L酪蛋白溶液 称取酪蛋白标准品1.000g,用少量0.5mol/LNaOH溶液(6.4)湿润后,加人0.01mol/LTris·HCl 缓冲液(6.1)约80mL,在沸水中边加热边搅拌,直至完全溶解,冷却后,转移至100mL容量瓶中,用适量 0.01mol/LTris·HCl缓冲液(6.1)定容至刻度。置于4℃保存备用。 6.6100μg/mLL-酪氨酸标准储备液 称取预先于105℃干燥至恒重的L-酪氨酸0.1000g用60mL1mol/LHCl溶液(6.3)溶解后定 容至100mL,配成1mg/mLL-酪氨酸标准溶液。再吸取1mg/mLL酪氨酸溶液10.00mL,用0.1mol/L 盐酸溶液(6.3)定容至100mL,即得到100ug/mL的L-酪氨酸标准储备液。注意避光保存。 7 分析步骤 7.1 标准曲线的绘制 7.1.1L-酪氨酸标准溶液 按表1配制L-酪氨酸标准溶液。 表1L-酪氨酸标准溶液配制 酪氨酸标准溶液的浓度 加入100μg/mL酪氨酸标准溶液的体积 加人去离子水的体积 管号 μg/mL mL mL 0 0 0 10 1 20 2 8 2 40 4 6 3 60 9 4 4 80 8 2 5 100 10 0 2
GB-T 33410-2016 生化试剂中蛋白酶K活性检测方法
文档预览
中文文档
5 页
50 下载
1000 浏览
0 评论
0 收藏
3.0分
赞助2元下载(无需注册)
温馨提示:本文档共5页,可预览 3 页,如浏览全部内容或当前文档出现乱码,可开通会员下载原始文档
下载文档到电脑,方便使用
赞助2元下载
本文档由 思安 于
2023-01-21 17:30:35
上传分享
举报
下载
原文档
(644.8 KB)
分享
友情链接
系统安全管理制度.pdf
DB3418-T 022-2022 检验检测机构远程检测服务规范 宣城市.pdf
GB-T 19713-2005 信息技术 安全技术 公钥基础设施 在线证书状态协议.pdf
GB-T 20278-2022 信息安全技术 网络脆弱性扫描产品安全技术要求和测试评价方法.pdf
GB-T 15148-2008 电力负荷管理系统技术规范.pdf
GB-T 33009.2-2016 工业自动化和控制系统网络安全 集散控制系统 DCS 第2部分:管理要求.pdf
GB-T 26610.3-2014 承压设备系统基于风险的检验实施导则 第3部分:风险的定性分析方法.pdf
渗透测试战技101.pdf
T-CPSS 1013—2021 开关电源电子元器件降额技术规范.pdf
GB-T 39908-2021 科技计划形成的科学数据汇交 通用代码集.pdf
GB-T 25285.1-2021 爆炸性环境 爆炸预防和防护 第1部分:基本原则和方法.pdf
GB-T 25647-2010 电子政务术语.pdf
GB-T 42752-2023 区块链和分布式记账技术 参考架构.pdf
NY-T 1060-2006 水泥生产用磷石膏.pdf
GB-T 41852-2022 半导体器件 微机电器件 MEMS结构黏结强度的弯曲和剪切试验方法.pdf
GB-T 6614-2014 钛及钛合金铸件.pdf
YD-T 1730-2008 电信网和互联网安全风险评估实施指南.pdf
GB-T 42860-2023 运载火箭运输通用要求.pdf
GM-T 0033-2023 时间戳接口规范.pdf
GB-T 12718-2009 矿用高强度圆环链.pdf
交流群
-->
1
/
3
5
评价文档
赞助2元 点击下载(644.8 KB)
回到顶部
×
微信扫码支付
2
元 自动下载
官方客服微信:siduwenku
支付 完成后 如未跳转 点击这里 下载
站内资源均来自网友分享或网络收集整理,若无意中侵犯到您的权利,敬请联系我们
微信(点击查看客服)
,我们将及时删除相关资源。